Tips dasar pikeun Crypresvasi budaya sél

Tips dasar pikeun Crypresvasi budaya sél

Sél neruskeun metabolisme maranéhanana dina kagiatan kamekaran normal, anu meryogikeun partisipasi rupa-rupa rupa rupa jinis rupa-rupa. Nalika suhu turun di handap -70 ° C, protence lirén damel. Ku sabab éta, di lingkungan anu sakedik suhu rendah, sél tiasa ngeureunkeun kagiatan métabik na sareng asupkeun kaayaan anu belas anu ngamungkinkeun kaayaan béjéngahkeun anu ngamungkinkeun.

1. Bahan ékspérimén

Bahan dasar:

Sedeng budaya dasar

Sérum (fbs konvensional / nbs)

Karyawan Ultrapure

Sekat diménsi suloxid (DMSO)

Solusi PBS ps pungkur fosfat

Bedil pipet

Gedés Pipetting listrik

Persiapan ékspérimén

a) persiapan solusi katirisan:

Sél Umum: 55% Sedal Sedal + 40% Serum Bovine (FBS / NBS) + 5% DMSO

Sél penting: 90% sérum sovine (fbs / nbs) + 10% DMSO

Alatjot solusi cresopresivasi anu disiapkeun kana tabung centrifuge 15 Ml] sareng toko dina 4 ° C kanggo dianggo.

(b) persiapan sél janten beku:

Sateuacan katiris sél, pilih sél kalayan status tumuwuh anu hadé sareng dina fase kamekaran logaritmic sareng ngagantikeunana kalayan sedeng seger 12-24 jam sateuacan katirisan pikeun ngajaga kaayaan sél.

2. Prosedur ékspérimén

1. Ningali kapadetan sél kudu beku, anu kira-kira 80% ~ 90%. Anggo gun pipette pikeun Asscirate bulu lami, tambahkeun pbs steril pikeun ngumbah sél 1-2 kali, sareng sedeng anu tinggal di lingkungan budaya.

2. Tambihkeun jumlah trypsin trypsin atanapi cukur pikeun ngawenangkeun trypsin pikeun nuliskeun sél, sareng nempatkeun kana incubator pikeun nyerna. Name nyaring kaayaan sél dina mikroskop: Squoplasm téh ngahasilkeun deui sareng sél henteu deui dihubungkeun kana lambar. Dina titik ieu, tambahkeun solusi ngeureunkeun pikeun ngeureunkeun prosés nyerna.

3. Lalaunan gelembung sél kalayan tip pikeun ngabentuk gantung sél sareng centrifuge sél sél dina 1000 rpm pikeun 3-5 menit.

Piceun supernatant, tambahkeun jumlah solusi anu katirisan, sareng gurun lirén pikeun ngadamel sél count Coand. Saluyukeun kapadetan sél nganggo sedeng centil

4. anggo gun pipette m pikeun misahkeun tabung ceurilogenik numutkeun kapasitas anu diperkirakeun, sareng nganggo mesin bungkus otomatis pikeun top sareng segel.

5. Program ciri standar nyaéta laju pendampang tina -1 ° C O2 ° C / Sareng sélna tiasa laun-laun tiasa laun-laun janten laun-léngkah ieu: suhu kamar) → 20 ° C (30min) → -80 ° c ° C (sapeupeuting) → neundeun anggap jangka panjang di nitrogén cair.

Éta ogé tiasa disimpen langsung saatos pengacara tab -80 ° C Sapeuting teras ditransfer ka nitrogén cairan kanggo neundeun.

Yongey To Medics mangrupikeun EncterPrise tinggi-téknologi khusus dina R & D, produksi sareng penjualan konsumén biomedis. Tips pipetik, pipet, piring pcr, produk sél sél sareng bahan beulah tukang jero sanésna. Yongey Gagak anu pantes amanah sareng pilihan anjeun! Wilujeng ka konsultasi!